酶聯(lián)免疫試劑盒實(shí)驗(yàn)規(guī)則
點(diǎn)擊次數(shù):689 更新時(shí)間:2019-01-14
酶聯(lián)免疫試劑盒用抗小鼠FVII抗體包被于酶標(biāo)板上,實(shí)驗(yàn)時(shí)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品中的小鼠FVII與包被抗體結(jié)合,游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗小鼠FVII抗體和辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和素??剐∈驠VII抗體與結(jié)合在包被抗體上的小鼠FVII結(jié)合、生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物,游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB),TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍(lán)色,加終止液后變成黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長處測OD值,小鼠FVII濃度與OD450值之間呈正比,通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品中小鼠FVII的濃度。
酶聯(lián)免疫試劑盒注意:
1、以上標(biāo)本均需密封保存,4oC保存應(yīng)小于1周,-20oC不應(yīng)超過1個(gè)月,-80oC不應(yīng)超過2個(gè)月。
2、標(biāo)本溶血會影響后檢測結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測。
3、標(biāo)本使用前應(yīng)緩慢均衡至室溫,不應(yīng)加熱使之融解。
酶聯(lián)免疫試劑盒使用技巧建議:
·建議檢測樣品時(shí)均設(shè)雙孔測定,以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。
·為防止樣品蒸發(fā),試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜。
·未使用完的酶標(biāo)板或者試劑,請于2-8℃保存。辣根過氧化物酶標(biāo)記抗人IgG工作液請依據(jù)所需的量配置使用。請勿重復(fù)使用已稀釋過的辣根過氧化物酶標(biāo)記抗人IgG工作液。
酶聯(lián)免疫試劑盒實(shí)驗(yàn)規(guī)則:
1、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
2、檢測前,要打開酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
3、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、待檢樣品要澄清,否則會影響結(jié)果。
5、溫浴時(shí)間應(yīng)遵守試劑盒規(guī)定。
6、應(yīng)盡量做雙孔實(shí)驗(yàn),這樣才能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。
7、對結(jié)果有疑問的樣品要用其它方法進(jìn)行確證。
酶聯(lián)免疫試劑盒產(chǎn)品滿足于生物化學(xué)、分子生物學(xué) 、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)等生物實(shí)驗(yàn)需求,不用于臨床診斷。